采血卡干血斑：生物转化的新应用？

组织样本的生物包装是一个昂贵的过程，需要处理、储存和运输的基础设施。一种具有50多年历史的血液采集方法可能具有生物基底技术的应用，可以在不影响质量或DNA产量的情况下使这一过程更加有效。自20世纪60年代以来，采血卡干血斑(DBS)一直被用于新生儿脚跟点刺试验，以鉴别患有苯丙酮尿症的新生儿。DBS还被广泛用于收集和储存样品，用于药物监测、遗传分析和分子流行病学研究，而运输和储存选择很少。Choi等人提出采用适当的提取方法，可以在不影响DNA产量和应用的情况下，利用DBS存储血样。

研究人员收集了edta处理的全血样本以及DBS，在室温下干燥24小时，从20至40岁的成年人中提取。他们将样本分成两组，一组在室温下储存，另一组在-80℃下保存。然后，他们又将样品再分成两周、四周或三个月保存。

当样品的储存时间结束时，研究小组从星展中提取单链dna(Ssdna)，首先将卡片切成小块，然后在室温下用500μL的蒸馏水将它们转移到1.5mL微生物中，持续5分钟。他们丢弃水，重复两次，然后将纸张浸泡在500μL的磷酸盐缓冲液或10 mm的Tris-EDTA中。他们把红细胞溶解在100μL将红细胞裂解缓冲液用10μL蛋白酶K在37℃下孵育一夜，然后用干净的吸管尖将滤纸压在试管底部，然后在95℃下进一步孵育15分钟，然后离心。他们将上清液保存在-80℃直到分析。

他们进行双链dna(Dsdna)提取，将切掉的DBS滤纸浸泡在40μL的磷酸盐缓冲液或Tris-edta中，并在37℃下孵育一夜。然后，他们使用DNease血液和组织试剂盒提取DNA。

他们用质量分光度法对DNA产量进行了分析，并测定了GAPDH和β-actin转录本，以验证提取的DNA的质量。室温保存在滤纸上的全血中dsDNA的产率约比布菲皮的产率高11%。在滤纸上采集的样品中DNA的稳定性高于冷冻液样品。通过对以同样方式保存的样本进行比较，他们发现冷冻全血的产率(39%)高于布菲毛皮(39%)。然而，这只比室温储存的DBS样品的收率高出11%。总的来说，室温下的DBS DNA纯度低于冷冻样品。

两周后提取的ssDNA量比全血样品高约65%，4周后约高44%。此外，从布菲皮毛样品中提取的sDNA纯度高于全血样品。在冷冻条件下贮藏时，产量仅受贮藏时间的影响。Tris-EDTA缓冲液也能产生较好的sDNA产率。同样，对GAPDH和β-actin转录本的测定表明，DBS在室温下可以产生适合于PCR分析的产物。